Внутренние болезни
ссылка на сайт www.vip-doctors.ru


Определение инулина в плазме крови.

1. Осаждение белков. В эрленмейеровскую колбу отмеривают 2 мл плазмы или сыворотки и 20 мл дистиллированной воды. Затем при непрерывном помешивании туда же прибавляют до 6 мл раствора сульфата кадмия. После этого при взбалтывании прибавляют по каплям 2 мл раствора NaOH. В течение последующего получаса содержимое колбы периодически взбалтывают. Затем образовавшийся белковый осадок отделяют центрифугированием и отфильтровывают через повторно кипяченую вату.

2. Определение инулина. Процедура гидролиза и реакция с резорцином производится в двух параллельных пробах каждого из безбелковых фильтратов порций плазмы, один из которых получен до, а другой-во время вливания инулина, и, кроме того, в двух «слепых» пробах, в которых безбелковый фильтрат заменен соответственным количеством дистиллированной воды.

В каждую колбу отмеривают по 2 мл раствора резорцина и по 5 мл раствора HCL , смешивают и прибавляют по 2 мл безбелкового фильтрата, а в слепых пробах -2 мл воды. В течение 15 минут колбы нагревают на водяной бане при 80°, затем 3 минуты охлаждают при комнатной температуре, после чего закупоривают резиновыми пробками. Колориметрируют при помощи ступенчатого фотометра или электрофотоколориметра. Из экстинкции проб, полученных во время вливания инулина, вычитают экстинкции контрольных и слепых проб. По заранее откалиброванной кривой, характеризующей соотношения между экстинкцией прибора и концентрацией инулина, находят концентрацию последнего в исследуемом растворе. При калибровке рекомендуется охватывать диапазон концентраций инулина от 1 до 50 мг%.

Определение инулина в моче производится таким же образом, как и в плазме крови. Предварительно мочу разводят в 50-100 раз.